人胎盤微血管內(nèi)皮細胞

細胞基本屬性：

質(zhì)量檢測：血小板-內(nèi)皮細胞粘附分子（PECAM-1/CD31）或血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等

產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管

培養(yǎng)基：人胎盤微血管內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%

 產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右

運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

背景介紹：

原代細胞的分離培養(yǎng)：

原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài)，表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細胞活動、結構、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。

（一）組織塊培養(yǎng)法

許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng)，因為方法簡單，細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后， 即可進行傳代。

1. 設備材料

培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。

2. 操作步驟

（1） 在無菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。

（2）用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。

（3）再用Hanks 溶液反復漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。

（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋，做好標記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。

（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量，以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。

（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。

（9） 一般說來，若培養(yǎng)液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面，即可進行傳代培養(yǎng)。

操作方法：

組織塊直接培養(yǎng)法（原代細胞培養(yǎng)實驗）

材料與儀器

【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞，成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數(shù)板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；

步驟

1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中，該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止。

公司正在出售的產(chǎn)品：

氧化蛋白質(zhì)水解酶

細胞乙酰化組蛋白H4染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次

CLIAKitforColIII(HumanCollageypeIII)ELISAKIT人Ⅲ型膠原規(guī)格：48T/96T

RatCiatesyhase,CSELISAKit大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠半乳凝素2(GAL2)ELISA試劑盒 ，英文名： GAL2 ELISA Kit

Human alpha enolase (alpha -enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA試劑盒

Humansphingomyelin,SMELISA試劑盒人鞘0脂(SM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ELISAKitMBP小鼠髓0脂堿性蛋白規(guī)格：48T/96T

humanB-cellleukemia/lymphoma3，Bcl3ELISAKit人B細胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠鎖鏈素免疫試劑盒 Mouse Desmosine ELISA Kit

谷酰胺酶(GLS)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣

RatOrexinAELISA試劑盒大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanHyaluronidase,HAaseELISA試劑盒人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit人雷帕靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

周期素D相互作用蛋白1抗體

海藻糖酶抗體

三聚胺單克隆抗體

NDST3蛋白抗體

線粒體內(nèi)膜蛋白抗體

半乳糖神經(jīng)酰胺酶抗體

磷酸化沉默調(diào)節(jié)相關蛋白6抗體

人胎盤微血管內(nèi)皮細胞CTR1抗體