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    酷愛ELISA實驗的新手們需留意這些細節(jié)

    點擊次數(shù):1243  更新時間:2019-04-24

            我司技能專員特意為大家準備十幾條載脂蛋白elisa檢測試劑盒操作的要點細節(jié),閱覽之后能夠總結一下您在實驗中有哪些要點被忽略掉了??釔跡LISA實驗的新手們需留意這些細節(jié):
    1.不管是試劑盒,還是其它產品,在運用之前咱們都要仔細閱覽說明書。
    2.相同的,一定要確定試劑盒是不是在有效期內。
    3.按說明書確定一切試劑齊全(數(shù)量、體積)。
    4.標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,留意低溫保存。
    5.ELISA實驗中為了確定*佳信號和背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在恰當規(guī)模內的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)供給的規(guī)模進行操作。
    6.規(guī)范品的:關于每種細胞因子應仔細閱覽說明書,留意每批的細節(jié)。在運用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其間的細胞因子。依據每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復溶。
    7.一般待測抗原規(guī)范曲線的線性規(guī)模的可通過將規(guī)范品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫靡?guī)范的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改動酶底物體系可在一定規(guī)模內提高靈敏度。
    8.依據檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量。
    9.按說明書將所用試劑平衡至室溫,所需試劑,DIY夾心法ELISA常見技能攻略。
    10.挑選抗體時挑選一個單抗和一個多抗進行配對;若挑選兩個單抗,有必要識別不同表位的抗體;從同一家公司挑選抗體對。
    11.為了優(yōu)化靈敏度,主張過夜孵育規(guī)范品和標本。
    12.若運用過氧化物酶作為顯色體系,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
    13.當測定混合液體中的抗原時,如血清,主張在標本稀釋液中加不相干的Ig。
    14.準備好一切實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。

     

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