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    費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌菌種程序

    點(diǎn)擊次數(shù):986次  更新時(shí)間:2017-03-01

    費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌菌種程序,通常分為母種、原種和栽培種3個(gè)層次,也就是通常所說的一級、二級、三級菌種。其中母種的分離選育技術(shù)性強(qiáng),要求精化;而原種和栽培種的制作則相對比較簡單。下面介紹各級菌種的制作技術(shù)。

    母種的分離選育方法是:母種主要采用人工選擇、誘變育種、雜交育種和原生質(zhì)融合等手段獲得。作為一般制種專業(yè)戶,可以采用人工選擇方式分離培育母種,具體步驟與操作方法如下。

    1.采集種源。費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌從野生或人工栽培群體中選擇有代表性的優(yōu)良菇體作為種源。①種菇選擇時(shí)間。一般在11月上中旬,在*批和第二批菇中挑選。因?yàn)檫@段時(shí)間蘑菇生長正是旺盛時(shí)期,菌絲生活力強(qiáng),子實(shí)體健壯,質(zhì)量好,加之氣溫適宜,蘑菇能正常成熟。②種菇的標(biāo)準(zhǔn)是:八成熟,朵形圓正,肉質(zhì)肥厚,顏色潔白,無病蟲害。采集一二朵符合上述標(biāo)準(zhǔn)的種菇編上號碼,作為分離母種的材料。從栽培室采集的應(yīng)標(biāo)有原菌株代號。

    2.培養(yǎng)基配制。瓊脂培養(yǎng)基又叫PDA培養(yǎng)基,常用配方為:馬鈴薯200克、瓊脂16~18克、葡萄糖20克、水1000毫升。先將馬鈴薯洗凈去皮,切成薄片,置于鋁鍋內(nèi)加水煮沸15~30分鐘至薯塊酥而不爛為止。煮后用6~8層事先浸濕擰干的紗布過濾,過濾后加入瓊脂16~18克(氣溫低時(shí)加16克,氣溫高時(shí)加18克)再煮,并不斷攪拌,使固體瓊脂*溶化,再用4~6層紗布過濾。將濾液加水至1000毫升加入20克葡萄糖,攪拌溶化趁熱分裝試管。裝入量為試管高度的1/4~1/5,注意培養(yǎng)基不要粘著試管口,管口用棉塞塞緊,或?qū)⒅貉b入玻璃三角瓶內(nèi),每瓶裝量為20毫升。然后置于高壓鍋內(nèi),在壓力達(dá)108千帕,鍋內(nèi)溫度為121℃滅菌30分鐘左右。滅菌后及時(shí)取出,趁熱將試管斜排于桌上,費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌冷卻后即成為固體斜面培養(yǎng)基。

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