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線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒

型 號(hào)

產(chǎn)品時(shí)間2024-11-21

所屬分類(lèi)氧化磷酸化系列

報(bào)價(jià)600

產(chǎn)品描述:線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒(熒光法)活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過(guò)氧化氫、及其下游產(chǎn)物過(guò)氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來(lái)自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過(guò)程有關(guān)。
正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)

產(chǎn)品概述

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產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)生化檢測(cè)試劑盒(熒光法)

100/96  

EY-01S151

 

10.png

測(cè)定意義:                         

活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過(guò)氧化氫、及其下游產(chǎn)物過(guò)氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來(lái)自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過(guò)程有關(guān)。

正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過(guò)多,就可破壞線粒體酶類(lèi)、脂類(lèi)和核酸,使機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時(shí),活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導(dǎo)致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。

因此,通過(guò)檢測(cè)活性氧的變化來(lái)判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

測(cè)定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過(guò)線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無(wú)熒光的DCFHDCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)了利用熒光法直接定量檢測(cè)線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。

 



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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。

12.png

1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè)。

2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測(cè)。

3、血清等液體:直接測(cè)定。

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蛋白激酶(A)熒光共振能量轉(zhuǎn)移法(FRET)、(B)化學(xué)發(fā)光法(luminometry)、

通用型胱(cystine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

MR-VP發(fā)酵管  BR    20  國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

組織脂質(zhì)過(guò)氧化氫(H2O2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體腹腔法動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑盒

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂  規(guī)格:  250g  用途:  廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別用于食品中李斯特氏菌的分離培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010SN/T 0184-2005I...

組蛋白H3-K27乙?;瘷z測(cè)試劑盒

載玻片細(xì)胞鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

肉消化物 2  規(guī)格:  25kg  用途:  用于培養(yǎng)基、生物發(fā)酵的原材料

組織基質(zhì)金屬(MMP-10)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

組織硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ) 250(g)  incubation media 李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ) 250(g)

LAMBDA噬菌體培養(yǎng)試劑盒

細(xì)菌尿肉湯

MR-VP培養(yǎng)基 用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))  incubation media MR-VP培養(yǎng)基 用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))

飼料三聚氰胺快速顯色定性檢測(cè)試劑盒(家用型/工業(yè)型)

線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)生化檢測(cè)試劑盒(熒光法)煙草疫霉     /

微生物干燥培養(yǎng)基

通用型細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體屬鑒定16S rDNA

含酶TSA培養(yǎng)基平板(7cm  10個(gè)/  用于醫(yī)藥環(huán)境監(jiān)測(cè)

產(chǎn)毒培養(yǎng)基      Toxin-Producing   Medium  250  用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)

CASPASE-5蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基(RCM  250g  用于梭菌的分離培養(yǎng)

MUG培養(yǎng)基  MUG-Mediumwith Kovacs  培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m  大腸埃希氏菌快速熒光測(cè)定

腦組織固著液(Bouin固著液)

瓊脂(不含亞碲酸)  250g  用于的選擇性分離培養(yǎng)

ER培養(yǎng)基  Eriksson Medium  10  BR

組織花生四烯酸(arachidonic acid)酶反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒

特殊蛋白胨/Peptone Special  BR  250  國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

大毛霉   細(xì)菌肥料  /

 

 

 

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(1)按照蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

活性單位定義:25℃中每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量

(4)按液體體積計(jì)算

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