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    菌種的保存方法

    點擊次數(shù):936次  更新時間:2016-11-21

    菌種的保存方法

    低溫保存法

    ①簡單保存法,

    將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、

    菌絲懸浮液以及由麩皮、

    大米、小米等谷物原

    料制成的孢子培養(yǎng)物置于

    4

    ℃冰箱保存,

    保存時間不超過12個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達(dá)34個月;

    ②液氮超低溫

    保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然

    后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至-35℃時,即可置于-150-196℃的液氮罐中保

    存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干

    燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

    脫水保存法

    ①沙土保存法,

    能產(chǎn)孢子的細(xì)菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經(jīng)稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅菌23次,烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長良好的孢子,用無菌餾水22.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經(jīng)真空抽干,外觀呈松散狀態(tài),4℃冰箱保存保存期可達(dá)57年。

    凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管內(nèi)于-20-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達(dá)510年之久。

    石蠟油封存法,在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm4℃冰箱或低溫干燥處保存,

    此法不適

    用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。

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