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    分析影響ELISA非特異性顯色

    點(diǎn)擊次數(shù):838次  更新時(shí)間:2016-11-25

    分析影響ELISA非特異性顯色

    目前因?yàn)榧夹g(shù)前提的限制,包被用抗原或抗體的純度不可能達(dá)到100%,所以有些非特異性顯色不可避免,只能盡可能進(jìn)步純度,進(jìn)步特異性。它具有良好的吸附機(jī)能,孔底透明度高,空缺值低,各板之間、統(tǒng)一板各孔之間機(jī)能相近。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、出產(chǎn)及使用中經(jīng)常會(huì)遇到非特異性題目,本文就在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的一些原因及如何采取一些措施,消除非特異性顯色作一分析。本文就這一原因作一扼要分析,以便可以通過(guò)以上措施把非特異顯色降至zui低限度,從而進(jìn)步檢測(cè)的特異性,并得到更正確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

     聚苯乙烯ELISA板因?yàn)樵系牟煌椭谱鞴に嚨牟顒e,各產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。溶血標(biāo)本,紅細(xì)胞溶解破裂,開(kāi)釋出血紅素形成,而血紅素中的鐵卟啉是過(guò)氧化物酶的類(lèi)似物,以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。因此,在選擇ELISA試劑盒同時(shí)要對(duì)其使用的微孔板型號(hào)進(jìn)行認(rèn)證,評(píng)估。試劑盒特異性因素固相載體的選擇,ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板zui為常見(jiàn)。外源性干擾物,經(jīng)常因樣品采集、貯存、處理不當(dāng)造成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝集不全等。如在冰箱中保留過(guò)久,其中的IgG可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。但因?yàn)槭芊椒▽W(xué)及技術(shù)前提的限制,在酶聯(lián)吸附測(cè)定中有時(shí)不可避免的會(huì)泛起一定的非特異性,但我們可以通過(guò)以上措施把非特異性顯色降至zui低限底,從而進(jìn)步檢測(cè)的特異性,并得到更正確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)自1971年自問(wèn)世以來(lái),以其敏感性高,特異性強(qiáng),操縱簡(jiǎn)便、安全,而廣泛應(yīng)用于臨床診斷,開(kāi)創(chuàng)了免疫學(xué)診斷。

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